GB 4789.13-2012食品安全国家标准　食品微生物学检验　产气荚膜梭菌检验.pdf

中华人民共和国国家标准 GB4789.13—2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验 2012-05-17发布 2012-07-17实施 中华人民共和国卫生部 发布 GB4789.13—2012 前 言 本标准代替GB/T4789.13—2003《食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验》。 本标准与GB/T4789.13—2003相比，主要变化如下： ——修改了标准的中文名称； ——修改了样品制备过程； ——修改了培养基与试剂； ——修改了操作步骤； ——修改了菌数计算部分； ——增加了附录A。 I GB4789.13—2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验 1 范围 本标准规定了食品中产气荚膜梭菌（Clostridiumperfringens）的检验方法。 本标准适用于食品中产气荚膜梭菌的检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a） 恒温培养箱：36℃±1℃； b） 冰箱：2℃～5℃； c） 恒温水浴箱：50℃±1℃，46℃±0.5℃； d） 天平：感量0.1g； e） 均质器； f） 显微镜：10×～100×； g） 无菌吸管：1mL（具0.01mL 刻度）、10mL（具0.1mL 刻度）或微量移液器及吸头； h） 无菌试管：18mm×180mm； i） 无菌培养皿：直径90mm； j） pH计或pH比色管或精密pH试纸； k） 厌氧培养装置。 3 培养基和试剂 3.1 胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸（TSC）琼脂：见附录A中A.1。 3.2 液体硫乙醇酸盐培养基（FTG）：见附录A中A.2。 3.3 缓冲动力-硝酸盐培养基：见附录A中A.3。 3.4 乳糖-明胶培养基：见附录A中A.4。 3.5 含铁牛乳培养基：见附录A中A.5。 3.6 0.1%蛋白胨水：见附录A 中A.6。 3.7 革兰氏染色液：见附录A中A.7。 3.8 硝酸盐还原试剂：见附录A中A.8。 3.9 缓冲甘油-氯化钠溶液：见附录A 中A.9。 4 检验程序 1 GB4789.13—2012 产气荚膜梭菌检验程序见图1。 检 样 25g(mL)检样+225mL0.1%蛋白胨水 均质、稀释 -1 -6 10 ～10 稀释液各1mL+TSC 琼脂混合 厌氧培养，36℃±1℃、20h～24h，黑色菌落计数 任选黑色菌落5个，分别接种FTG培养基 确证试验 镜检形态 牛奶发酵 动力-硝酸盐 乳糖-明胶