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卷 期
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年 月
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枯草芽孢杆菌寡聚 ，葡萄糖苷酶基因的
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克隆及其在大肠杆菌中的表达
蒋思婧 马立新
（湖北大学生命科学院分子微生物与基因工程研究室 武汉 !-##0 ）
摘 要：本研究用鸟枪法构建了枯草芽孢杆菌（ ） 的基因组文库，经平板
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法筛选得到了六株能水解合成底物对3硝基苯3 373葡萄糖吡喃糖苷的阳性克隆，经鉴定均含
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克隆了寡聚 ，葡萄糖苷酶基因的重组质粒（命名为 ）。选择 ，
3/ 03 )568##/ 9 )568##0 )568##-
对其插入片段测序分析，此片段内有一编码 个氨基酸的开放阅读框，该蛋白质的计算分
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子量为 。 的寡聚 ，葡萄糖苷酶的氨基酸序列与 和凝结芽孢杆
04 :.14;7 56## 3/ 03 !#$%%’ ) ’
菌（ ）的寡聚 ，葡萄糖苷酶的氨基酸序列一致性分别为 、 ，相似性
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分别为 、 。从 中扩增出寡聚 ，葡萄糖苷酶基因，克隆到 上，转化
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大肠杆菌（ ） ，得到三个能水解对 硝基苯 葡萄糖吡喃糖苷的阳性克隆
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，将此三个菌株热诱导表达， 电泳可检测到特异表达的蛋白
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质，其中 、 表达的蛋白约 ，为完整的寡聚 ， 葡萄糖苷酶，而
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表达的蛋白质偏小；表达的蛋白质均有寡聚 ，葡萄糖苷酶活性。
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关键词：枯草芽孢杆菌，寡聚 ，葡萄糖苷酶，鸟枪法克隆，基因表达
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中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
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