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叶现代农业科技曳圆园园9年第6期 大田农艺
PEG处理对种子线粒体中抗坏血酸要谷胱甘肽循环的影响
孙海平 汪晓峰
渊北京林业大学生物科学与技术学院袁北京100083冤
摘要 选用对吸胀冷害敏感的大豆品种[Glycinemax渊L.冤Merr.]中黄22为试材袁PEG 引发处理不同时间袁于恒温培养箱培养48h后提取
种子子叶中的线粒体袁不连续蔗糖梯度离心纯化后袁测定线粒体中抗氧化酶和抗氧化剂的变化情况遥结果表明院PEG 引发处理后大豆种子
发芽指数尧活力指数均提高袁种子线粒体中超氧化物歧化酶渊superoxidedismutaseSOD冤尧抗坏血酸过氧化物酶渊ascorbateperoxidaseAPX冤尧谷
胱甘肽还原酶渊glutathione reductase GR冤尧单脱氢抗坏血酸还原酶渊monodehydroascorbate reductase MDHAR冤和脱氢抗坏血酸还原酶
渊dehydroascorbatereductaseDHAR冤的活性均提高袁还原型抗坏血酸渊ascorbateASC冤/脱氢抗坏血酸渊dehydroascorbateDHA冤和还原型谷胱甘
肽渊glutathioneGSH冤/氧化型谷胱甘肽渊oxidizedglutathioneGSSG冤值增加遥说明PEG 引发处理增强了种子活力袁提高了大豆种子抗吸胀冷
害的能力遥
关键词 大豆种子曰PEG曰线粒体曰抗氧化还原系统
+
中图分类号 Q945.65 文献标识码 A 文章编号 1007-5739渊2009冤06-0135-02
许多栽培植物的种子在吸水萌动的初始阶段袁如遇上 1.4 线粒体的提取及纯化
低温易发生吸胀冷害袁影响种子的出苗率和成活率袁使幼苗 [7]
1.4.1 提取 遥大豆种子置于33%渊W辕 V冤PEG6000水溶液中袁
[1袁2]
的生长势下降袁最终导致产量下降 遥最早由Heydecker等 于25益渗控不同时间渊0h尧12h尧24h尧48h尧72h冤袁并同时置于
提出通过种子引发来克服农业生产上遇到的种子冷害问 4益冰水中低温吸胀24h袁放于HPG-280H人工气候箱内培养
题袁且已证实具有显著作用遥陶宗娅等认为发生吸胀冷害的 48h后袁取20g大豆种子子叶袁将子叶放在盛有约35mL研磨
要害是阻碍线粒体的正常发育袁使其失去正常提供能量的功 介质中研磨成糊状遥 研磨介质的成分为院0.4mol/L蔗糖尧
[2袁3]
能 遥同时AnaJimenez 等证实了线粒体中ASC-GSH 的存 50mmol/LTris-HCl缓冲液 渊pH值8.0冤尧1mmol/LEDTA-Na 尧2
[5袁6]
在袁以及ASC-GSH在非生物胁迫下的抗氧化胁迫作用 袁 0.1%BSA尧1%PVP遥匀浆用4层纱布过滤袁滤液于 1000g离
说明该系统在抗性方面具有重要作用遥因此袁本文通过PEG 心 10min袁取其上清液 10000g离心15min袁沉淀用20mL研
引发处理后种子线粒体中抗氧化系统的变化与种子抗吸胀 磨介质洗涤袁在 10000g下再次离心 15min袁将沉淀悬浮于
冷害能力的关系袁以探讨其可能的耐寒机理袁并为农业生产 1mL悬浮介质中即得到粗制线粒体悬浮液遥悬浮介质的成分
提供理论依据遥 为院0.4mol/L蔗糖尧50mmol/LTris-HCl缓冲液渊pH值7.2冤尧
1 材料与方法
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