维甲酸调控IGF-2基因对软骨细胞促凋亡的作用.pdfVIP

2008 2 22 2 中国修复重建外科杂志 年 月第 卷第 期 217 · · 维甲酸调控IGF-2 基因对软骨细胞促凋亡的作用 1 2 1 1 1 郭磊 赵玉岩 张世亮 刘魁 高晓宇 【摘 要】 目的 探讨维甲酸对软骨细胞凋亡的影响及细胞内IGF-2 的表达规律。 方法  1 月龄雄性中国白 兔 1 只，体重约500 g 。取兔双膝关节股骨髁软骨，采用胰酶消化法体外培养白兔软骨细胞。取第2 代软骨细胞，培养 -6 液内加入终浓度为1×10 mol/L 的全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid，ATRA ）25 μL （实验组），作用24 h ；对照组加入 25 μL DMEM 液作为对照。采用细胞免疫组织化学法观察软骨细胞中Ⅱ型胶原的分泌变化，流式细胞仪检测软骨细胞 凋亡率，RT-PCR 半定量分析软骨细胞中IGF-2 mRNA 的表达，Western blot 印迹杂交鉴定软骨细胞中IGF-2 蛋白质表 达。 结  果 实验组ATRA 抑制了软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达。流式细胞仪检测实验组软骨细胞凋亡率为21% ± 2% ， 较对照组（5% ± 1%）增加了5 倍；RT-PCR 检测实验组IGF-2 mRNA 的表达为0.2 ± 0.1，较对照组（0.8 ± 0.2 ）降低75% ； Western blot 印迹杂交分析发现，实验组软骨细胞IGF-2 的表达为0.3 ± 0.1，较对照组（0.7 ± 0.2 ）降低了57 ％；各指标组间 比较差异均有统计学意义（P 0.05 ）。 结论 维甲酸可能通过抑制软骨细胞靶基因IGF-2 的表达，负性调节软骨细胞分 泌和增殖功能，促进软骨细胞凋亡。 【关键词】 维甲酸 软骨细胞 凋亡 IGF-2 基因表达 中图分类号：R681.6  Q812 文献标志码：A PRO-APOPTOTIC EFFECT OF RETINOIC ACID ON CHONDROCYTE THROUGH REGULATION ON GENE EX- 1 2 1 1 1 1 PRESSION OF IGF-2/ GUO Lei , ZHAO Yuyan , ZHANG Shiliang , LIU Kui , GAO Xiaoyu . Department of Orthopedic 2 Surgery, Department of Endocrinology, the First Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang Liaoning, 110001, P.R.China. Corresponding author: GUO Lei, E-mail: G572@ 【Abstract 】    Objective To investigate the effect of retinoic acid (RA) on cell apoptosis