右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响.pdfVIP

北京中医药大学学报 第36卷第8期2013年8月 542 of Journal ofTraditionalChineseMedicineV01．36No．8 BeijingUniversity Aug．2013 右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响+ 汤小康1’2 应航2。倪哲吉1·2樊燕华m 李敏2 童培建3 肖鲁伟2 (1浙江中医药大学第一临床医学院浙江310053；2浙江中医药大学；3浙江省中医院骨伤科) 摘要：目的探究牵张应力作用下右归饮含药血清刺激大鼠成骨细胞后，对其碱性磷酸酶(ALP)分 泌的影响，评价右归饮在模拟人体内应力环境中促进成骨细胞增殖分化的作用。方法 随机将40 只SD大鼠均分为右归饮组和生理盐水组，右归饮组每天按含生药量20g／kg灌胃，生理盐水组灌 以等量的生理盐水，连续灌胃1周；末次灌胃2h后，常规麻醉，心脏取血，分离提取血清，一20℃保 存2组血清；采用序列酶消化法培养成骨细胞，传至第4代将细胞等量接种为6组，每组6孔，分别 标记为无血清培养基对照组、生理盐水血清组、右归饮含药血清组、无血清12％牵张形变组、生理 盐水血清12％牵张形变组和右归饮含药血清12％牵张形变组，无血清培养基同步化培养24h；将 右归饮含药血清及生理盐水血清分别作用于右归饮含药血清组、右归饮含药血清12％牵张形变组 和生理盐水血清组、生理盐水血清12％牵张形变组细胞，同时采用0．5Hz频率、12％形变量的牵张 力对相应无血清组细胞、右归饮血清组细胞及生理盐水血清组细胞进行力学加载。分别于12h和 24 h对各组细胞行ALP定量测定，检测各组细胞ALP活性；加力24h后，行碱性磷酸酶染色 (CAKe)，显微镜镜检拍照，检测成骨细胞胞浆内CAKP颗粒数目及分布；并利用统计学软件对数 据进行分析。结果0．5Hz、12％牵张应力条件下无血清组细胞与常规培养条件下无血清组细胞 比较，前者ALP表达受抑制(P0．05)；牵张应力条件下右归饮血清培养液与生理盐水血清培养 液，较常规培养条件下2种血清培养液比较，均能刺激成骨细胞ALP表达(P0．05)，且力学环境 下右归饮组ALP值高于生理盐水血清组(P0．05)。结论无血清条件下，牵张应力表现出抑制 成骨细胞ALP表达现象；右归饮在模拟人体牵张应力环境下能促进成骨细胞的增殖分化。 关键词：牵张应力；成骨细胞；碱性磷酸酶；右归饮；大鼠 中图分类号：R285．5 doi：10．3969／j．issn．1006-2157．2013．08．010 Influenceof Yinonsecretionofalkaline ofosteoblasts Yougui phosphatase insimulatedinternalstressenvironmentofhuman body+ TANG Yah—hual，2，LIMin2，TONG Xiao—kan912，YINGHan92+，NIZhe-ji1’2，FAN Pei-jian3，XIAO Lu—wei2 Fimt ofClinical ChineseMedical 310053；2 (1 College Medicine，Zhejiang University，ZhejiangZhejiang of ChineseMedical Provincial Chinese University：3Zhejiang Hospital Medicine)