利用正交设计优化小苍兰issr-pcr 反应系统.pdfVIP

第! 卷# 第$ 期# # # # # # # # # # # # # 植# # # 物# # # 研# # # 究 !%% 年# 月 ’()* !# +(* $# # # # # # # # # # # # ,-../01+ 23 ,204+154. 6/7/4658 9:)* ，# !%% 利用正交设计优化小苍兰1776=M56 反应体系 周凌瑜# 吴晨炜# 唐东芹# 宋会书# 刘群录! （上海交通大学农业与生物学院园林科学与工程系，上海# !%%!$% ） 摘# 要# 通过.N （$; ）正交试验，研究了镁离子浓度、I+0M 浓度、模板O+4 浓度、!# O+4 聚合酶 浓度、引物浓度这; 个因素在$ 个水平上对1776=M56 的影响，建立了适合于小苍兰1776=M56 的反 应体系。优化体系为：!; !. M56 反应体系中含有 P !# 酶缓冲液（% @@() ·. L Q5) ， @@() ·. L （+8 ）72 ，% @@() ·. L 0RBE ·85) ，S8 * % ，% * %;T +M=$% ），! @@() ·. L UV5) ，%W %N - · . L $ ! $ ! ! !# 酶，% * $ @() ·. L 引物，$ * % KV ·. L 模板O+4 ，I40M 、I50M 、IX0M 、I00M 各%W N @@() ·. L 。 ! ! 利用温度梯度M56 ，确定了最适宜的退火温度为;* ;Y 。该优化体系的建立为下一步对小苍兰 进行1776 分子标记奠定了基础。 关键词# 1776=M56 ；小苍兰；优化；正交设计 中图分类号：7 * $N ；Z$?* !# # 文献标志码：4# # 文章编号：N? L ;%! （!%% ）%$ L %$%! L %N !#$%$’#$() *(+ ,--./01. -23#4% (* !##$% #’ () 56’## 78+(9:8 !+#8(:()’6 ;43$:) [82- .BKV=\:# ]- 5^HK=]HB# 04+X O(KV=ZBK# 72+X 8:B=7^:# .1- Z:K=.: ! （7J^(() (_ 4VRBJ:)G:RH AKI ,B()(V‘ ，7^AKV^AB 9BA( 0(KV -KBaHREBG‘ ，7^AKV^AB# !%%!$% ） =3#+’## 0^H H__HJGE (_ aARB(:E _AJG(RE (K 1776=M56 RHAJGB(K ，E:J^ AE J(KJHKGRAGB(K (_ UV! b ，I+0ME AKI SRB@HRE ，O+4 GH@S)AGH AKI !# O+4 S()‘@HRAEH ，cHRH BKaHEGBVAGHI G( (SGB@BdH G^H 1776=M56 RH= AJGB(K E‘EGH@ (_ $%’( %) %*+ G^R(:V^ (RG^(V(KA) GHEGE* 0^H (SGB@BdHI 1776=M56 E‘EGH@ (_ $, %) %*+ BKJ)(IHI P !# O+4 S()‘@HRAEH e:__HR （% @@() ·. L Q5) ， @@() ·. L （+8 ）72 ，% @@() ·. L $ !