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( ) 4·14 · Ch inese J Reparative and Reconstructive Surgery, 2003, V o l 17 5 以 929 细胞为滋养层的尿道黏膜上皮细胞体外培养 L 1 2 3 2 2 翟弘峰 李森恺 刘 红 李养群 徐 军 【摘 要】 目的 探索尿道黏膜上皮细胞体外培养的技术和方法, 为进一步采用组织工程技术构建尿道黏膜组 织奠定基础, 并为尿道黏膜的生理、药理、毒理学及微生态研究提供实验模型。 方法 取刚离乳的雄性新西兰幼兔尿道 黏膜组织, 分别以 消化液和混合消化液消化成单细胞悬液, 以差速贴壁法排除成纤维细胞, 接种后以 929 细 D ispase L 胞为滋养层细胞进行培养, 定期换液, 细胞生长、增殖至 80%～ 90% 融合时传代。细胞进行常规 H E 染色、流式细胞仪检 测, 以扫描电镜、透射电镜观察其超微结构。再分别设立实验组( ) ( n = 20 、阳性对照组 正常尿道黏膜组织石蜡切片, ) ( ) n= 20 及阴性对照组 成纤维细胞铺片, n= 20 行免疫组织化学染色。 结果 原代培养 10 天左右细胞逐渐生长融合成 片, 如铺路石状, 细胞大小均一。上皮细胞为二倍体细胞, 生长期内均为单一的上皮细胞, 无成纤维细胞混杂生长, 细胞可 传 11～ 13 代, 成活 50～ 60 天。 结论 新西兰幼兔尿道黏膜上皮细胞可在体外进行培养, 在一定时间内保持增殖活力, 为构建组织工程化尿道奠定了基础, 且为尿道黏膜的体外研究提供了实验模型。 【关键词】 组织工程 尿道上皮细胞 929 细胞 体外培养 L 929 , URETHRAL EP ITHEL IUM CUL TURE BY USING L CELL S AS TROPHOD ERM IN V ITRO ZH A I H ong f eng , , . , . , L I S en kai L IU H ong et al D ep artm ent of P lastic S u rg ery H enan P rov incial P eop le ’s H osp i
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