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维普资讯 第 25卷 第 1期 中山大学学报 (医学科学版) V01．25 NO．1 2004拒 1月 JOURNALOFSUN YAT，SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2004 兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征 张志光 ，郑卫平 ，苏 凯 ，许 跃 (1．中山大学光华E1腔医学院 ·附属E1腔医院，广东 广卅I 510055； 2．广东省人民医院E1腔科 ，广东 广州 510080) 摘 要 ：【目的】探讨兔关节软骨细胞的分离 、培养方法，观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况 。 【方 法】无菌条件下，从 2周龄新西兰 白兔的颞颌关节及四肢关节髁突面削取软骨片，采用机械 一酶消化法分离软骨 细胞 ，经台盼蓝拒染计数 ，将细胞按 1×10个 ／孔接种于 6孔培养板，传代培养 ，描绘生长 曲线。利用相差显微 镜及透射电镜观察细胞形态。应用甲苯胺蓝及 Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。 【结果】每克软骨能获取 1．5×10 个软骨细胞，活性率为 95％。培养 2—3d，细胞贴壁、变形 ，呈多角形 ；8d左右 ，细胞融合成层 。透射 电 镜观察显示细胞核圆形 ，有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分。甲苯胺蓝及 Ⅱ型胶原染色阳性。细 胞传至 5代后 ，出现 “成纤维细胞样”。 【结论 】本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法 ；初代 、第 2代 细胞生长良好 ，适合于实验研究；软骨细胞 5代培养后 ，细胞表型发生改变。 关键词 ：关节 ，软骨 ／细胞学；细胞培养；软骨细胞 ／超微结构 中圈分类号：R782 文献标识码：A 文章编号：1672—3554(2004)01．0063．04 Isolation，CultureandM orphologicalCharacteristicsofRabbit ArticularChondrocyte ZHANG Zhi—guang ，ZHENG W ei—ping2，SU Kai ，XU Yue (1．GuanghuaSchoolofStomatology，SUNYat·senUniversity，Guangzhou510055，China； 2．DepartmentofStomatology，People’SHospitalofGuangdongProvince，Guangzhou510080，China) Abstract： 【Objective】Tostudythemethodsforisolationandcultureofarticularchondrocyteand toobservethephenotypicexpressionofthemonolayerculturedcellsatahighdensity．【Methods】Carti— lagewasharvestedinsmallsliceswithasharp knifeundersterileconditionsfrom temporomandibular jointandothersynovialjointsof2NewZealandwhiterabbits．Thesliceswerecutintosmallpieces anddigestedinenzymesolution．Af
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