紫外-荧光微孔板酶检测技术测定土壤酶活性.docVIP

 紫外-荧光微孔板酶检测技术测定土壤酶活 性# 杨金燕1，田丽燕1，李廷强2* 5 10 15 20 25 30 35 40 （1. 四川大学建筑与环境学院； 2. 浙江大学环境与资源学院） 摘要：采用一种新的土壤酶检测技术-荧光微孔板酶检测技术，测定土壤硫酸酯酶、磷酸 酶、?-葡萄糖苷酶和肽酶活性，采用紫外微孔板酶检测技术测定多酚氧化酶和过氧化物酶 活性。结果表明，紫外-荧光微孔板酶检测技术可快速测定土壤中酶的活性。采自农田的昔 格达土的硫酸酯酶、磷酸酶和肽酶活性高于紫色土和采自矿山的昔格达土的相应的酶活 性；矿山昔格达土的多酚氧化酶和过氧化物酶活性在三者中最高；紫色土的β-葡萄糖苷酶 活性高于昔格达土的β-葡萄糖苷酶活性。 关键词：土壤，酶，荧光微孔板酶检测技术，紫外微孔板酶检测技术 中图分类号：S154.36 Enzyme Assay of Soil using Ultraviolet and Fluorescence Microplate YANG Jinyan1, TIAN Liyan1, LI Tingqiang2 (1. College of Architecture and Environment, Sichuan University; 2. College of Natural Resources and Environmental Science, Zhejiang University) Abstract: The activity of soil sulphatase, phosphatase, peptidase and ?-glucosidase were measured using 96-well microplate fluorimetric assay, and phenol oxidase and peroxidase activity were measured using 96-well microplate ultraviolet spectrophotometry. The correlation between soil physical and chemical properties and enzyme activities were discussed. The activity of sulphatase, phosphatase and peptidase of Xigeda soil taken from farmland were higher than Xigeda soil taken from mining area and purple soil; ?-glucosidase activity of purple soil was the highest in tested soils; but phenol oxidase and peroxidase activity of Xigeda soil taken from mining area were the highest. Key words: Soil; enzyme; 96-well microplate fluorimetric assay; 96-well microplate ultraviolet spectrophotometry 0 引言 土壤中酶是植物、动物、微生物活动的产物，它与土壤微生物共同推动土壤的代谢过程。 由于土壤酶参与土壤中许多重要的生物化学反应过程，参与土壤有机物质的分解转化，且与 C、N、S、P等各元素的生物循环密切相关，因而常被作为评价土壤肥力的重要指标之一[1-4]。 影响土壤酶活性的因素错综复杂，土壤微生物种类、水气热状况、酸碱度、结构组成、 养分丰缺、污染程度及施肥方式等都显著地影响着土壤酶活性。研究土壤酶活性与土壤理化 性质、水热状况及其它性质的关系，对于探讨土壤酶在生态系统中的作用和地位具有重要意 义[5]。 土壤酶检测技术的创新是土壤酶学得以发展的前提和基础。20 世纪 50 年代以后，滴定 法、比色法等广泛用于土壤酶的测定。近年来，由于生物化学和分子生物技术的飞速发展， 基金项目：教育部高等学校博士点科研基金项目(200806101129)；科技部国际合作项目（2011DFA101222） 作者简介：杨金燕（1977-），女，副教授，主要研究方向：土壤污染化学. E-mail: yanyang@scu.edu.cn -1-  土壤酶的检测技术也取得了长足的进展。荧光微孔板酶检测技术逐渐被国外研究者广泛用来 研究土壤酶多样性及其功能多样性[6,7]，但国内应用此方法对土壤酶的研究鲜见报道。本文 45 选择了与土壤 C、N、P、