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心脏微血管内皮细胞的细胞外基质对骨髓 间充质干细胞移行的观察 张靓1,2,3,4,曹亮1,2,3,4,郑馨1,2,3,4,沈晓涛1,2,3,4,齐绪峰1,2,3,4,陈若翰1,2,3,4, 5 10 15 20 25 蔡冬青1,2,3,4** (1. 暨南大学再生医学教育部重点实验室,广州 510632; 2. 科技部及广东省科技厅国际合作基地,广州 510632; 3. 再生医学联合实验室(香港中文大学-暨南大学),广州 510632; 4. 暨南大学发育与再生生物学系,广州 510632) 摘要:背景:细胞外基质所构成的微环境对细胞的贴壁、移行、增殖和分化等具有重要的调 控功能。心脏微血管内皮细胞所产生的细胞外基质可能对干细胞移行的调控作用尚不清楚。 目的:观察心脏微血管内皮细胞所分泌的呈三维分布的细胞外基质对骨髓间充质干细胞移行 的影响。方法:分离、培养大鼠心脏微血管内皮细胞,通过洗脱细胞法获得其分泌的呈三维 分布的细胞外基质。然后,将大鼠的骨髓间充质干细胞分别接种于底部没有处理的培养皿, 呈二维分布、使用 I 型胶原蛋白处理基底的培养皿,呈二维分布、使用纤维连接蛋白处理基 底培养皿和心脏微血管内皮细胞所分泌的呈三维分布的细胞外基质培养皿上,并培养 20 个 小时,用 Time-lapse 技术对细胞运动情况进行记录,并用 IPP 软件计算出经接种骨髓间充 质干细胞移动的速度。结果与结论:大鼠骨髓间充质干细胞在心脏微血管内皮细胞所分泌、 呈三维分布的细胞外基质上的运动速度为 19.15±0.36μm/h,而在底部没有处理的培养皿, 使用 I 型胶原蛋白处理基底的培养皿、使用纤维连接蛋白处理基底培养皿上的运动速度分别 为 8.44±0.42μm/h,11.92±0.42μm/h 和 5.86±0.79μm/h。心脏微血管内皮细胞分泌、 呈三维分布的细胞外基质组的运动速度分别明显快于其他组别(P0.05)。上述结果提示: 1)骨髓间充质干细胞在心脏微血管内皮细胞所分泌的呈三维分布的细胞外基质上移行的速 度明显高于在没有细胞外基质,及呈二维分布、只含有单一细胞外基质成份(I 型胶原蛋白 或纤维连接蛋白)的基底上的移行速度;2) 心脏微血管内皮细胞所分泌的细胞外基质所构 成的三维微环境,对心脏内外源性干细胞及经移植进入心脏的干细胞的移行充当重要的调控 角色。 关键词:心脏微血管内皮细胞;三维分布细胞外基质;细胞移行 中图分类号:科技论文 30 The Investigation of Extracellular Matrix of Cardiac Microvascular Endothelial Cells in Migration of 35 40 Mesenchymal stem cells Zhang Liang1,2,3,4, Cao Liang1,2,3,4, Zheng Xin1,2,3,4, Shen Xiaotao1,2,3,4, Qi Xufeng1,2,3,4, Chen Ruohan1,2,3,4, Cai Dongqing1,2,3,4 (1. Key Laboratory for Regenerative Medicine,Ministry of Education, GuangZhou 510632; 2. International Base of Collaboration for Science and Technology(JUN),Ministy of Science and Technology Guangdong Province, GuangZhou 510632; 3. Joint Laboratory for Regenerative Medicine,The Chinese University of Hong Kong-Ji Nan University, GuangZhou 510632; 4. Department of DevelopmentalRegenerative Biology,Ji Nan University, GuangZhou 510632) 基金项目:本文的研究得到 863 项目(2007AA02Z105),国家自然科学基金30570369;广东省自然科学基金重点项目;广东省科技攻关项目(2004, 广东省国际合作项目;中央高校基本科研业务费专项资金的资助。 作者简介:张靓,(1985-),女,硕士研究生,主要从事心脏微血管内皮细胞的细胞外基质形态功能的研 究。 通信联系人:蔡冬青,(1963-),男,教授,博士
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