选修三细胞工程晚读.pptVIP

专题2 细胞工程 分为植物细胞工程和动物细胞工程： 植物细胞工程的技术手段有植物组织培养技术 和植物体细胞杂交技术，其中植物组织培养技术是基础； 动物细胞工程的技术手段有动物细胞培养技术，动物体细胞核移植技术以及动物细胞融合，其 中动物细胞培养技术是基础；单克隆抗体是 动物细胞融合的主要应用。 基础的意思是相应的其它技术中都会使用到它! 植物组织培养 植物体细胞杂交技术 植物细胞工程的实际应用 动物细胞培养技术 动物体细胞核移植技术 动物细胞融合技术 基因工程的填空 选择题要注意的问题 1.限制酶作用的是特定序列两条链上的两个磷酸二酯键,它不能断裂脱氧核苷酸内部的化学键，不同限制酶切割不同DNA产生的黏性末端可能相同！ 2.用作运载体的质粒都是人工改造的！ 3. cDNA是外显子，无内含子，启动子，终止子！ 4.PCR技术中是加热变性解开的氢键！ 5.启动子和终止子是基因上调控转录的一小段DNA片段，而起始密码子和终止密码子是mRNA上调控翻译的三个碱基。tRNA一边是反密码子能与mRNA上密码子配对，另一边携带相应的氨基酸，密码子有64种，但由于三种终止密码子不编码氨基酸，所以反密码子只有61种，相应的 tRNA也只有61种。 6.检测目的基因是否表达，应通过抗原抗体杂交进行翻译层次的检测，也可从个体水平上检测性状的表现情况！ 7.蛋白质工程实质是对基因结构进行修饰或合成！ 8.全能性表达终点是个体！ 9.高度分化的细胞如浆细胞不能增殖！ 10.动物细胞培养用的培养液为液体培养基，要加血清和抗生素，还要定期更换培养液，需要无菌操作，培养箱中的CO2作用是维持培养液的PH * * 1、原理： 2、流程： 植物细胞具有全能性 全能性是指细胞发育成完整个体的潜能，终点是个体，原因是生物体每个细胞都含全套的遗传物质，而细胞分化成各种组织和器官的原因是基因选择性表达 脱分化+再分化：具体的是离体的组织作为外植体，在诱导培养基上脱分化成愈伤组织,再在分化培养基上再分化成胚状体或丛芽，最终形成完整个体幼苗。 注意:①外植体应选择分化程度低的组织,因为易于脱分化②植物培养基为固体培养基,关键是生长素和细胞分裂素的用量比，始终在无菌条件下操作； ③愈伤组织是未分化的细胞团，分裂能力很强，类似受精卵，因此没有特定的结构和功能 2、原理： 1、流程： 细胞膜具有一定的流动性+植物细胞具有全能性 植物原生质体融合+植物组织培养： 注意:①植物体细胞杂交技术的终点是杂种植株，不是杂种细胞；②用于融合的两个细胞可以是同一种植物的两个细胞，也可以不是体细胞而是配子（精子或卵子）; ③若A为二倍体基因型AaBb，B为四倍体基因型CCCCDddd，融；该杂种植株为六倍体，基因型为AaBbCCCCDddd 具体是先用纤维素酶和果胶酶去除两种植物细胞A和B的细胞壁，再在聚乙二醇诱导下，完成原生质体的融合，结果产生三种AA,AB,BB，经过筛选得到AB这个杂种细胞，再生出细胞壁是融合成功的标志；再将杂种细胞接种到相应培养基完成脱分化和再分化最终得到杂种植株。 3、优点： 克服了远缘杂交不亲和的障碍 2、育种： 1、用于无性繁殖 ①微型繁殖：即快速繁殖，优势在于不仅保持了优良品种的遗传特性，还可快速大量繁殖；②作物脱毒：切取茎尖等分生区进行组织培养，原因是分生区无毒； ③人工种子：由人工种皮+胚状体+人工胚乳组成 ①单倍体育种：花药离体培养+秋水仙素处理幼苗，具体是取花粉作为外植体,进行花药离体培养得到单倍体植株,再用低温或秋水仙素处理，原理是抑制纺锤体的形成，染色体不能移向两极，细胞内的染色体数目加倍。结果是得到正常可育的纯合植株。优点是明显缩短育种年限。 ②突变体的利用：用物理或化学方法诱导愈伤组织发生基因突变，这样再分化出来的植株就是突变植株了！ 再读一遍！ 2、流程:取胚胎或幼龄动物组织(原因是分裂能力强),剪碎并用胰蛋白酶处理(作用是消化细胞间的蛋白，使组织分散成单个细胞),再用培养液稀释成细胞悬液，转入培养液中进行原代培养，接着会出现细胞贴壁(要求底物光滑无毒易于贴附)一般在瓶底贴成单层细胞，接触抑制(细胞相互接触抑制了对方的增殖空间)； 当原代培养的细胞达到一定数量时，需再次用胰蛋白酶处理(作用是解除接触抑制)并用培养液稀释分装成多瓶细胞悬液，这称为传代培养。用于传代培养一般为冷冻保存的10代内细胞，作用是保持细胞正常二倍体核型。正常的细胞只能增殖50次左右便死亡,在此期间遗传物质不变,但极少数细胞会发生基因突变成为不死性细胞(瘤细胞),因具有无限增殖的能力,应用于单克隆抗体的制备。 1、原理： 细胞增殖 读二遍！ 2、流程:通过显微操作取供体细胞