植物多倍体的人工诱导和鉴定.pptVIP

植物多倍体的人工诱导和鉴定 实验原理 实验用品 实验目的 实验步骤 作业 实验目的 ?掌握诱发多倍体的一般方法 了解人工诱导多倍体的原理、方法及其在植物育种上的意义 观察植物染色体数目的变化引起植物其它器官的变异 实验原理 自然界各种生物的染色体数目一般是相当稳定的，这是物种的重要特征。由于各种生物的来源不同，细胞核内可能具有一个或一个以上的染色体组，凡是细胞核中含有一套完整染色体组的就叫做单倍体，亦用n表示。具有两套染色体组的生物体称为二倍体，以2n表示。细胞内多于两套染色体组的生物体则称为多倍体。在整倍体中，又可按染色体组的来源，区分为同源多倍体和异源多倍体。凡增加的染色体组来自同一物种或者是原来的染色体组加倍的结果，称为同源多倍体。如果增加的染色体组来自不同的物种，则称为异源多倍体。 实验原理 多倍化是植物新物种形成的重要途径，也是进行物种间遗传转移的重要手段和桥梁。在诱发多倍体的方法中，以应用化学药剂更为有效。如秋水仙素、萘嵌戊烷、异生长素、富民农等，都可诱发多倍体。用秋水仙素溶液处理植物的种子或幼苗，是常用的人工诱导多倍体的有效方法。秋水仙素是从百合科秋水仙属的一个种，秋水仙(Colchicum?autumnale)的种子及器官中提取出来的一种生物碱，其分子式为C22H25NO6，因有剧毒，故使用时要特别注意，切勿使药液进入眼内或口中。秋水仙素诱导作用在于阻止有丝分裂细胞的纺锤丝的形成。而对染色体的结构和复制无显著影响。若浓度适合，药剂在细胞中扩散后，不致发生严重的毒害，这样纵列为二的染色体不能向两极分开，因而便产生了染色体加倍的重组核。当药剂的作用消除后，由于多倍体细胞继续分裂，便得到多倍体组织，以后则产生新的多倍体植株。  实验原理 鉴定多倍体可分直接鉴定和间接鉴定。直接鉴定是将经过秋水仙素溶液处理的根尖、茎尖进行染色体计数，多倍体植株的染色体是加倍的。间接鉴定是根据多倍体植株外部形态变化的主要特征是巨大性这一点提出的。花粉粒和气孔的增大常作为染色体数目加倍的辅助性指标。 实验用品 材料 大麦种子 药品 0.05—0.1%秋水仙素、卡诺固定液、1mol/L盐酸、改良石炭酸品红染色液。 器材 镊子、刀片、载玻片、盖玻片、青霉素瓶、吸管、吸水纸、显微镜、恒温水浴锅。 实验步骤 种子萌发 先将种子清水洗净，浸种。待露白后置于培养皿中发芽。 预处理 当根长1cm时，取出洗净吸干，用0.05—0.1%秋水仙素溶液浸根处理24～36小时，根尖明显膨大时用固定液固定。 酸解 将材料放入青霉素瓶中西净， 1moL/LHCl60oC进行酸解，不同的材料的酸解时间不同.(大麦8-10分钟) 染色 酸解后洗净材料，将根尖部分切下（约1mm），加改良石炭酸品红染色. 压片 染色后盖上盖片，用大拇指按压有材料的部位，粗滤纸吸干多余染液，再用铅笔头轻敲，使重叠细胞分散，得到理想的分裂相. 观察 低倍镜找到分散良好的分裂相后换高倍镜或油镜. 作业 ?分别绘制染色体分散良好的加倍细胞核和未加倍细胞图。 ?秋水仙素处理后，根尖为什么会发生膨 大？ * * *