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观察植物细胞的有丝分裂 实验原理 一、细胞核内的染色体容易被碱性染料(龙胆紫或醋酸杨红)着色 二、植物的有丝分裂常见于根尖,茎尖的分生区细胞 三、根据染色体的行为变化判断各个时期 实验器材 洋葱(预先培养生根处理) 显微镜,载玻片,盖玻片,剪刀,镊子,滴管,平皿 15%盐酸+95%酒精混和(1:1)作为解离液,0.01g/ml 0.02g/ml龙胆紫染液 实验步骤 洋葱的根尖预培养 实验课前的3—4d,取洋葱一个,放在广口瓶或烧杯上,瓶内装满清水,放置在光照处。注意每天换水1—2次,使洋葱的底部总是接触到水。待根长到5cm时,取生长健壮的根尖制片观察。 实验步骤 解离:取根尖2—3mm(最好在每天的10—14点取根,因此时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期),立即放入盛有质量分数为15%的氯化氢溶液和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,在室温下解离3—5min 何为解离?目的? 主要是使得细胞彼此分离 解离要注意的几点: 剪取根尖的长度2-3mm 立即放入盛有适量解离液的玻璃皿中 室温解离3-5分钟最佳(酥软,不能太硬也不能太软) 用镊子轻轻取出根尖 实验步骤 漂洗 用镊子去除根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分钟 ( 思考:目的?) 需要注意: 动作轻,不要把根尖弄碎 漂洗的目的是去除根中多余的解离液,特别是盐酸,因为染色时用的是碱性染料龙胆紫,酸与碱发生反应会影响染色效果 实验步骤 染色 再次轻轻取出漂洗干净的根尖放入滴有一滴龙胆紫的在载玻片上,染色3-5min 染完之后用吸水纸将多余的染液除去,再加一滴请水。 需要注意: 夹取根尖时一定要注意不要夹根尖头部,可以夹取根尖的后部。 过长过短都不好,为什么???(深,浅) 目的是观察细胞核中染色体的形态变化,我们通常用染色液对染色体进行着色 染色时间过长过短都不好,为什么? 染色时间亦不能过长,否则会使染色体与周围的其他结构均被着色,这样就无法形成颜色上的反差,不便于观察。 染色时间亦不能过短,否则会使染色体不能很好着色。 实验步骤 制片 观察 显微镜的使用(回顾,演示) 低倍镜观察 慢慢移动装片找到分生区细胞 特征:较小,呈正方形,排列紧密,有的正在分裂 换高倍镜观察 用细准焦螺旋和反光镜调节视野清晰 找到有丝分裂前,中,后,末期的细胞,并用铅笔绘图。 观察 注意: 在一个视野中处于分裂期的细胞是少数的,绝大多数的细胞处于??期,为什么?? 一个视野中很难找全各个时期的细胞,可以慢慢移动装片,从临近的视野中找。 下列关于在制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片时,在盖玻片上再加一载玻片进行压片的目的的叙述,不正确的是( ) A.避免压碎盖玻片 B.防止盖玻片移动 C.避免压碎载玻片 D.使压力均匀分布 在显微镜下能看到细胞核的是 ( )? A.间期 B.前期 C.中期 D.后期 如图为某学生所绘制的植物细胞有丝分裂过程中染色体行为简图,其中不正确的是 ( )? 、在观察有丝分裂的实验中,一般用根尖而不能用洋葱鳞片叶表皮的原因是( ) A.洋葱表皮细胞因有紫色液泡而使分裂看不清 B.洋葱表皮细胞太小 C.洋葱表皮细胞一般不发生分裂 D.根尖细胞较大且呈正方形 在制作洋葱根尖有丝分裂装片过程中,细胞停止分裂的时间是 ( ) A.解离时 B.漂洗时 C.染色时 D.压片时 * * 解离根尖培养好以后,装片制作是否成功,关键的步骤是解离。15%的盐酸溶液和95%的酒精溶液能溶解细胞壁之间的中层物质(胞间质),使组织中的细胞相互分开。 就是用要药液使组织的细胞相互分离开来,便于最后制片时能被压成一薄层进行显微观察。解离液中酒精的作用是迅速杀死细胞,而盐酸的作用是使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。 另外解离时间不宜过短,否则根尖未充分解离,压片时细胞分不开,细胞重叠;但又不能太长,否则使根尖过分酥软,无法进行漂洗和染色,且染色体成分被破坏。这一步是实验成功与否的关键,也可手拿镊子,轻轻按正在解离的根尖,感觉酥软即可。 注意: 盖盖玻片时要从一侧接触,慢慢放下,注意不要产生气泡; 压片时不要太用力,只要细胞散开既可。 后期 中期 根尖预培养(已完成) 解离 剪取根尖的长度2-3mm 立即放入盛有适量解离液的玻璃皿中 室温解离3-5分钟最佳(酥软,不能太硬也不能太软
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