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解析根据乙图引物引导子链延伸的方向可知,若通过PCR技术扩增该目的基因,应该选用引物甲和引物丙,A正确;根据质粒上限制酶识别序列的分布位点可知,构建表达载体时,不能选用限制酶BamHⅠ,否则会导致两种抗性基因都被破坏,因此应该选择BclⅠ和HindⅢ这两种限制酶,限制酶破坏的是磷酸二酯键,B错误;检测目的基因在受体细胞中是否表达出蛋白质,应采用抗原—抗体杂交技术,C正确;质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞,但不能促进目的基因的表达,D错误。解析非选择题FEIXUANZETI答案三、非选择题9.(2023·湖南,21)某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答下列问题:(1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌,培养基的主要营养物质包括水和____________。(2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽孢杆菌H,其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽对__________________________的抑制效果较好,若要确定其有抑菌效果的最低浓度,需在________μg·mL-1浓度区间进一步实验。淀粉、无机盐金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌1.73~3.45注:“+”表示长菌,“-”表示未长菌。(3)研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表达质粒载体,转入大肠杆菌成功构建基因工程菌A。在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中,传代多次后,生产条件未变,但某子代菌株不再产生淀粉酶M。分析可能的原因是_________________________________________________(答出两点即可)。答案淀粉酶M基因发生突变或含有M基因的表达载体丢失测试菌抗菌肽浓度(μg·mL-1)55.2027.6013.806.903.451.730.86金黄色葡萄球菌-----++枯草芽孢杆菌-----++禾谷镰孢菌-++++++假丝酵母-++++++(4)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官,可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体,如图所示。肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH以及____________________________(答出两点)等基本条件。肺类装配体形成过程中是否运用了动物细胞融合技术?________(填“是”或“否”)。答案适宜的气体和无菌、无毒的环境否(5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一种耐药菌,严重危害人类健康。科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型,来探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。以下实验材料中必备的是________。①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MRSA感染的肺类装配体③解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽④生理盐水⑤青霉素(抗金黄色葡萄球菌的药物)⑥万古霉素(抗MRSA的药物)答案②③④⑥解析(1)培养基的成分一般包含水、碳源、氮源和无机盐等营养成分,筛选分解淀粉的固氮细菌所需要的选择培养基中,除含水、无机盐外,还应含有淀粉,而不能含有有机氮。(2)从表中数据可以看出,抗菌肽浓度为3.45~55.20μg·mL-1时,金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均无法存活,禾谷镰孢菌和假丝酵母在抗菌肽浓度为55.20μg·mL-1时无法存活,而在抗菌肽浓度低于27.6μg·mL-1(含)时可存活,故抗菌肽对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制效果较好。抗菌肽浓度为1.73μg·mL-1时,金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均能存活,而在3.45μg·mL-1时均不能存活,所以若要确定抗菌肽有抑菌效果的最低浓度,应在1.73~3.45μg·mL-1浓度区间进一步实验。解析(3)淀粉酶M基因发生突变或含有M基因的表达载体丢失时,菌株不能再产生淀粉酶M。(4)动物细胞培养除需要满足适宜的营养、温度、渗透压和pH条件外,还需要适宜的气体环境(95%空气和5%CO2)以满足代谢需求和维持培养液pH,以及无菌、无毒的环境防止其他微生物的污染和细胞代谢物的危害。肺类装配体形成过程涉及两种或多种细胞的共培养,但并未运用动物细胞融合技术。解析(5)若要探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力,需至少取三组MRSA感染的肺类装配体进行培养,第一组加入解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽,第二组加入万古霉素(作为有抗菌效果的对照),第三组加入等量生理盐水(作为无抗菌效果的对照),观察并比较三组肺类装配体的生长情况,若第一组肺类
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