真菌的实验诊断0826——胡主任.ppt

真菌感染的实验诊断;真菌感染的危险因素：;医学重要的酵母菌分类

SegalB,BowEJ,MenichettiF:InfectDisClinNAm2002;16:935-64;霉菌;诊断方法;真菌病实验室诊断主要内容;真菌感染的诊断;有意义的真菌培养标本;直接镜检的浮载液和染色剂;直接镜检;菌丝和孢子;直接镜检——酵母细胞;隐球菌病—直接镜检〔墨汁染色〕;有意义的涂片结果;多细胞真菌形态;真菌培养;真菌培养检查;092;区分酵母样或霉样菌落;Aspergillusfumigatus-ColonialMorphology,Sabouraud葡萄糖琼脂培养基烟曲霉菌

;Aspergillusfumigatus-MicroscopicMorphology,100xLactophenolcottonblue(单列)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、分生孢子

;Aspergillusflavus-在Sabouraud葡萄糖琼脂黄曲霉菌

生长快黄色外表粉末状;Aspergillusflavus-MicroscopicMorphology,100xLactophenolcottonblue黄曲霉菌(二列为主)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子

;Penicilliumspecies-ColonialMorphology,Sabouraudagar青霉属气生菌丝密毯状;Penicilliumspecies-MicroscopicMorphology,400xLactophenolcottonblue青霉属(帚狀枝,分生孢子);Aspergillusniger-ColonialMorphology,Sabouraudagar

黑曲霉菌

;Aspergillusniger-MicroscopicMorphology,100xLactophenolcottonblue(二列为主)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子

;真菌体外药敏试验;真菌体外药敏试验;液基稀释法

CLSIM27A2：致病性酵母菌

CLSIM38A：产孢丝状真菌

琼脂稀释法

纸片扩散法——CLSIM44-A

E－test法;;;096;白色念珠菌;白色念珠菌;白色念珠菌;白色念珠菌;白色念珠菌;白色念珠菌;体外抗真菌药敏试验与体内疗效;

真菌特异性抗原的免疫学检测

;;(1-3)-?-D-Glucan生物活性;;比浊法反响机理;G试验;(1→3)-β-D-葡聚糖检测;(1→3)-β-D-葡聚糖检测;G试验商品化试剂盒

detectsinonehour

1天津滨海新区金山川公司生产产品

2Fungitec-Gglucan(Seikagaku)Obayashi1992

cutoff：20pg/ml

3FungitellTMAssay(AssociatesofCAPECOD)

cutoff：80pg/ml;;酵母菌、丝状真菌细胞壁成分

不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属

不能检测：隐球菌和接合菌

美国FDA已批准，欧洲局部国家已??册

敏感性、特异性：90％左右;;?－D－葡聚糖参考值;ThecutoffofGtest;曲霉菌半乳甘露聚糖〔GM〕;曲霉菌半乳甘露聚糖〔GM〕;曲霉菌半乳甘露聚糖〔GM〕;影响GM检测的因素;GM试验假阳性问题;;适宜的判定折点：1.0,0.7,0.5?

在儿童的应用价值？

食物中的GM可以被吸收，假阳性？

哌拉西林/他唑巴坦治疗，假阳性？

非血液病患者应用不多

抗真菌治疗对结果的影响？;两种试验敏感性、特异性相当

都可以在早期诊断侵袭性曲霉病，但是?－D－葡聚糖可能出现更早

两者结合，可以互补

弥补GM假阴性可能

同样在粒细胞缺乏患者用的多，其他患者有待研究

;血清抗体检测

由于患者存在免疫受损，抗原递呈功能和及淋巴细胞功能受损，不能产生足够的抗体。

诊断价值较低。

;系统性真菌感染诊断的进展;检测真菌的特异性酶;PCR;PCR诊断侵袭性真菌病;

发热期间至少有一瓶血培养真菌阳性

持续稳定的血念珠菌抗原阳性

或高的抗念珠菌抗体滴度(ELISA);需要解决的问题……;微生物标准-1;微生物标准-2;微生物标准-3;小结;谢谢！