中药制剂含量测定技术—紫外可见分光光度法.pptx

APPLICATION EXAMPLES OF UV-VIS SPECTROPHOTOMETRY– STANDARD CURVE METHOD紫外-可见分光光度法的应用实例——标准曲线法 案例导入 紫外-可见分光光度法测定中成药含量 某中药制剂规格为0.3g/粒，测定其含量时先配制其活性成分A的对照品溶液，再精密量取不同体积的对照品溶液，稀释后配制成一系列不同浓度的对照品溶液，再照紫外-可见分光光度法，于规定波长处分别测定吸光度，然后以浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求出回归方程 为什么要配制一系列不同浓度的对照品溶液? 案例导入 紫外-可见分光光度法测定中成药含量至少配制几种浓度的对照品溶液？案例中采用的含量测定方法与吸收系数法和对照品法都不同，如何计算供试品溶液的浓度？ 一、方法简述 紫外-可见分光光度法系指通过测定被测物质在紫外和可见光区(200～760nm)对光的吸光度或发光强度的变化，进行定性定量分析的方法紫外-可见分光光度法朗伯-比尔定律Lambert-Beer定律 本法设备简单、操作便捷、灵敏度和准确度较高，是中药制剂定性鉴别、杂质检查和含量测定的常用方法 二、含量测定方法吸收系数法对照品法标准曲线法 对照品溶液配制 供试品溶液配制仪器校正选择测定条件样品测定含量计算基本操作步骤：Lambert-Beer定律紫外-可见分光光度法 三、标准曲线法的应用 当吸光度和浓度关系不呈线性良好时，应取数份梯度量的对照品溶液，用溶剂补充至同一体积，显色后测定各份溶液的吸光度，然后以吸光度与相应的浓度绘制标准曲线，再根据供试品的吸光度在标准曲线上查得其相应浓度或根据标准曲线回归方程计算出浓度，然后求出含量紫外-可见分光光度法 本法主要用于总成分的含量测定，适用于批量样品的分析，当仪器和测定条件固定时，曲线可多次使用测定成分应用举例总黄酮小儿七星茶口服液、汉桃叶片、独一味胶囊（片）、夏枯草口服液等（总）生物碱风湿骨痛胶囊、华山参片、产康复颗粒等硫酸亚铁新宝胶囊、复方皂矾丸等 紫外-可见分光光度法方法步骤：配制一系列不同浓度的对照品溶液（Ci）在相同条件下，分别测定各标准溶液的吸光度（Ai） 以标准溶液浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，建立A～c标准曲线得出回归方法，要求相关系数r≥0.999 紫外-可见分光光度法 在相同条件下，测定供试品溶液的吸光度（AX） 从标准曲线上查出对应的浓度根据W供= C供V供D供，计算出被测物质的含量 将供试品吸光度带入回归方程，求出样品的浓度 应用实例 【处方】 薏苡仁417g，稻芽417g，山楂208g，淡竹叶313g，钩藤156g，蝉蜕52g，甘草52g紫外-可见分光光度法小儿七星茶口服液中总黄酮的含量测定 【含量测定】 对照品溶液的制备 取芦丁对照品49.86mg，精密称定，置25m量瓶中，加70％乙醇20m，置水浴上微热使溶解，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得 应用实例紫外-可见分光光度法小儿七星茶口服液中总黄酮的含量测定 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml和6.0ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，混匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂作空白，照紫外可见分光光度法(通则0401)，在505nm波长处测定吸光度并记录 应用实例 测定法 取装量项下的本品，混匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起依法测定吸光度为0.486。本品每支装10ml,每1ml含总黄酮以芦丁(C27H30016)计，不得少于3.0mg。试计算本品中总黄酮含量是否合格紫外-可见分光光度法小儿七星茶口服液中总黄酮的含量测定 含量（mg/单位制剂）：紫外-可见分光光度法? 应用实例紫外-可见分光光度法小儿七星茶口服液中总黄酮的含量测定含量（mg/支）=?????? 本品规格为每支装10ml，故含量为3.23mg/ml，比药典要求的3.0mg/ml大，因此本品总黄酮含量合格 链接未来岗位 中药制剂中有效成分或特征性指标成分含量的测定对于评价中药质量的优劣具有重要意义，同时也是药品质量检验中的关键环节。本讲内容既是知识体系中的重点内容，也是岗位工作中的重要技能