比色分析及分光.ppt

光电二极管阵列型（DAD) 标准曲线法 其方法是先配制一系列浓度不同的标准溶液，用选定的显色剂进行显色，在一定波长下分别测定它们的吸光度A。以A为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制A-c曲线，若符合朗伯—比尔定律，则得到一条通过原点的直线，称为标准曲线。然后用完全相同的方法和步骤测定被测溶液的吸光度，便可从标准曲线上找出对应的被测溶液浓度或含量，这就是标准曲线法。 在仪器、方法和条件都固定的情况下，标准曲线可以多次使用而不必重新制作，因而标准曲线法适用于大量的经常性的工作。 7.3.3 分光光度测定的方法 Blank Standard Sample Sample 标准对照法(直接比较法) 将试样溶液和一个标准溶液在相同条件进行显色、定容，分别测出它们的吸光度，按下式计算被测溶液的浓度。 k标=k测 b标=b测 所以 要求A与c线性关系良好，被测样品溶液与标准溶液浓度接近，以减少测定误差。用一份标准溶液即可计算出被测溶液的含量或浓度，方便，操作简单。 3．吸光系数法 在没有标准品可供比较测定的条件下，按文献规定条件测定被测物的吸光度，从样品的配制浓度、测定的吸光度及文献查出的吸光系数即可计算样品的含量，因为 则样品含量 * * 7　比色分析及分光光度法 7.1 概述 7.2 光的吸收定律——朗伯—比尔定律 7.3 紫外—可见分光光度计及测定方法 7.4 显色反应及其影响因素 7.5 紫外—可见分光光度法的误差和测量 条件的选择 7.6 紫外—可见分光光度法应用实例 学习要求 1．了解物质颜色与光的吸收关系 2．了解紫外—可见分光光度法的仪器及测量误差和测量条件的选择 3．了解显色反应及其影响因素 4．熟悉紫外—可见分光光度法的实际应用 5．掌握朗伯—比尔定律及其偏离的原因 6．掌握紫外—可见分光光度法的测定方法 7.1 概述 分光光度法是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。按物质吸收光的波长不同，可分为可见分光光度法、紫外分光光度法及红外分光光度法。 特点： *灵敏度较高（1~10·L-1），适用于微量组分的测定。但相对误差较大（2~5%）。 *具有操作方便、仪器设备简单、灵敏度和选择性较好等优点，为常规的仪器分析方法。 7.1.1 光的基本性质 光是一种电磁波。所有电磁波都具有波粒二象性。光的波长、频率与光速c的关系为： （7-1） 光速在真空中等于2.9979×108m·s-1。 光子的能量与波长的关系为： （7-2） 式中E为光子的能量；为频率；h为普朗克常数，为6.626×10-34J·S。 电磁波谱 表7-1 电磁波谱范围表 光谱名称 波长范围 跃迁类型 　分析方法 X射线 10-1~100nm K和L层电子 X射线光谱法 远紫外光 10~200nm 中层电子 真空紫外光度法 近紫外光 200~400nm 外层电子 紫外光度法 可见光 400~750nm 外层电子 比色及可见光度法 近红外光 0.75~2.5?m 分子振动 近红外光谱法 中红外光 2.5~5.0?m 分子振动 中红外光谱法 远红外光 5.0~1000?m 分子转动和振动 远红外光谱法 微波 0.1~100cm 分子转动 微波光谱法 无线电波 1~1000m 核的自旋 核磁共振光谱法 7.2.1　物质的颜色与光的关系 单色光(monochromatic light)只具有一种波长的光。 混合光 由两种以上波长组成的光。 白光　是由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种色光按一定比例混合而成的。 物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用而产生的。例如：硫酸铜溶液因吸收白光中的黄色光而呈蓝色；高锰酸钾溶液因吸白光中的绿色光而呈紫色。因此，物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。 如果把两种适当颜色的光按一定的强度比例混合也可以得白光，这两种光就叫互补色光。 　如果吸收光在可见区,吸收光的