第二章第三节仪器法血细胞检查.ppt

主讲： 杨祚升 南华大学第一临床学院临床检验教研室 授课内容 概述 仪器法测定原理 方法学评价 分析仪应用进展 先进技术预览 概 述 1.手工法： 原理简单、方便实用，但是比较费时费力、影响因素较多。 2.仪器法： 灵敏度高、技术 先进、信息含量大、容易标准化，规范化。 1)．电阻式 2)．光学式 3)．离心式 仪器法测定原理 电阻式仪器法测定原理及临床意义 光学式仪器法测定原理 离心式仪器法测定原理 电阻式仪器法测定原理及意义 一．白细胞分析原理 二．红细胞分析原理 三．血小板分析原理 四．分析仪检测参数及临床意义 （一）．细胞直方图的应用 （二）．RDW的临床意义 （三）．血小板参数的临床意义 光学式仪器法测定原理 离心式仪器法测定原理 一．原理： （干式细胞计数仪）血液＋AC荧光染色剂 离心 红细胞、粒细胞、淋巴细胞、血小板、血浆 二．细胞着色的特点 1．红细胞不着色，为暗红色。2．粒细胞呈桔黄色。3．淋巴细胞呈绿色。4．血小板呈淡黄色。5．血浆为透明的浅黄色。 方法学评价 一．WBC计数及分类计数 1．手工法：用显微镜目视计数是基础方法，但是存在固有误差（计数板、吸管等系统误差）、技术误差（重复性、准确性相对较差）。 2．仪器法：可标准化，便于质控。精密度、准确性较高（需经严格校正后） 二．仪器法分类计数为大致的分群不是真正的分类，不能完全代替手工法 分析仪应用进展 一．仪器测试原理的改进。 1．容量、电导、光散射白细胞分类法 2．阻抗与射频技术联合的白细胞分类法 3．光散射与细胞化学技术联合应用于白细胞分类法 4．多角度偏振光散射白细胞分类技术 二．仪器自动化水平的提高。 三．各种特殊技术的应用。 先进技术预览 * * 1．电阻抗法血细胞分析仪基本结构示意图2．W.H.Coulter原理: 根据血细胞非传导的性质,以电解质溶液 中悬浮的白细胞，在通过计数小孔时引起的电阻变化，而进行血细胞的计数和体积测定。 3．根据检测项目的不同设定小孔直径的不同。 4．根据细胞大小的不同，所形成的脉冲信号强弱不同。 白细胞体积的大小经过溶血剂的处理后，形成大小不等的颗粒。小细胞区主要是淋巴细胞；中间细胞区主要是M、E、B等；大细胞区主要是中性粒细胞。 WBC Analyzer 5．血细胞的脉冲信号经过放大、甄别、整形后，送入计数系统，得出计数结果。（细胞分布直方图） 图1-2 白细胞体积分布直方图 小细胞 中间细胞 大细胞 fl REL NO R1 R2 R3 R4 WBC 1．红细胞计数（RBC）和红细胞比积（Hct） 1）RBC原理（脉冲数的多少） 2）Hct/PCV原理（脉冲的高度与叠加） 3）白细胞数的干扰 4）红细胞体积分布直方图 2．血红蛋白（Hb）含量测定 1）原理： 血液＋稀释剂＋溶血剂 Hb＋溶血剂 血红蛋白衍生物（HiCN,SLS-Hb…） Hb检测系统 2）溶血剂配方不同所形成的Hb衍生物也不同 3）ICSH推荐HiCN法为仪器校正的标准方法 4）HiCN最大吸收在540nm，含毒性。 100 200 fl RBC RBC溶解 RBC Analyzer 3．各项红细胞指数检测原理 1）MCV,MCH,MCHC计算原理同手工法 2）RDW(红细胞体积分布宽度） RDW－反映外周血液红细胞体积异质性的参数， 或是反映外周血红细胞体积大小不等的客观指标。 3）RDW的表示方法 RDW-CV RDW-SD L1 L2 X轴上的68.28% (可信区间) RDW-CV 100% 20% RDW-SD 1．与RBC共一系统，不同的域值（2～30fl）为PLT 1）脉冲多少——PLT 2）脉冲大小——MPV 2． 专门设置：鞘流技术、浮动界标、拟合曲线等血 小板 准确性技术。 10 20