三维设计高中生物选修③ 第一讲 基因工程(徐州 生物杜老师).ppt

据图回答： (1)图中基因组文库________(小于/等于/大于)cDNA文库。 (2)B过程需要的酶是__________；A、C过程中________(可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。 (3)目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中__________和__________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是____________。 解析：由图示可知，mRNA是酵母菌DNA上的基因选择性转录获得的产物，因此二者对应的文库大小情况是基因组文库大于cDNA文库。B过程mRNA→DNA为逆转录过程，需要逆转录酶的催化。由于两种方法选择的目的基因相同，都是植酸酶基因，且都是从酵母菌体内提取的(DNA或mRNA)，因此碱基序列相同，可用同一种探针来筛选含目的基因的菌株。PCR技术中需要在高温条件下进行DNA的解旋，因此所用的酶要耐高温。 答案：(1)大于　(2)逆转录酶　可以　 (3)DNA　cDNA　耐高温　 关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置如图： (1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血。主要原因是 鸡血细胞液中________含量较高。 (2)在上图A所示的实验步骤中加蒸馏水20 mL的目的是 ______________。通过图B所示的步骤取得滤液，再在 滤液中加入2 mol·L－1NaCl溶液的目的是____________， 图C所示实验中加蒸馏水的目的是________________。 (3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可滴加 ________溶液，结果丝状物被染成绿色。 [解析]　(1)鸡血细胞中含较多的DNA，而血浆中不含DNA，因此 实验材料应用鸡血细胞液而不用鸡全血。 (2)要明确区别两次加蒸馏水的目的，第一次目的是让鸡血细胞吸水涨破，放出DNA，第二次加蒸馏水是为了降低NaCl溶液的浓度，使溶解于2 mol·L－1NaCl溶液中的DNA析出。 (3)本题考查DNA的鉴定，可以加二苯胺沸水浴变蓝色，也可加甲基绿使DNA变绿色，本题干无沸水浴这一条件，且结果是丝状物变绿色，所以使用的试剂为甲基绿。 [答案]　(1)DNA　(2)使血细胞吸水涨破，放出DNA　使滤液中的DNA溶于盐溶液　使DNA析出　(3)甲基绿 [随堂高考] 1.(2008·全国卷Ⅰ)已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子 上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分 子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四 种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若 在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理 论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长 度不同的DNA片段种类数是 (　　) A.3　　　　　　　　B.4 C.9 D.12 解析：若该线性DNA分子在3个酶切位点切断，得到4种长度不同的DNA片段；若在2个酶切位点切断，得到3种长度不同的DNA片段；若在1个酶切位点切断，得到2种长度不同的DNA片段。因此最多能产生4＋3＋2＝9(种)长度不同的DNA片段。 答案：C 2．(2008·海南高考)下图为某种质粒表达载体简图，小箭头 所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。 据图回答： (1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有____________、___________、________________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行_________________________________________________。 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是__________________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有_______________。 (3)目的基因表达时，RNA聚合